基于HPLC-UVD-ELSD對酸棗仁中斯皮諾素及酸棗仁皂苷A的含量測定
更新時間：2025-10-20
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酸棗仁為鼠李科植物酸棗的干燥成熟種子，其核心功效為養心補肝、寧心安神、斂汗生津，臨床常用于治療心肝血虛所致的心悸失眠、虛煩多夢、自汗盜汗及津傷口渴等癥；常與茯苓、知母等配伍增強安神之效，或與人參、黃芪合用改善氣虛汗出。現代研究表明，酸棗仁在調理神經衰弱、更年期綜合征等方面有一定的應用價值。
斯皮諾素是從酸棗仁中提取的黃酮碳苷類化合物，在部分鼠李科植物中也有分布，其獨特結構賦予良好水溶性與生物活性，具有鎮靜安神、抗氧化、抗炎等功效，可改善睡眠，保護心腦系統；目前廣泛應用于中藥制劑、功能性食品及保健品領域。
酸棗仁皂苷A是從酸棗仁中提取的五環三萜皂苷類成分，結構復雜且具有特異性；具備顯著的鎮靜催眠、抗焦慮作用，還能調節血脂、保護心肌。憑借這些藥理活性，酸棗仁皂苷A成為中藥安神方劑的關鍵物質，也在心血管疾病防治相關的醫藥研發與功能性產品開發中備受關注。
酸棗仁試樣經浸泡、加熱回流后，采用梯度洗脫條件，使用十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，紫外-可見光檢測器串聯蒸發光散射檢測器檢測，斯皮諾素檢測波長為335 nm，酸棗仁皂苷A采用蒸發光散射檢測器檢測，分別用外標法與外標兩點對數方程計算酸棗仁中斯皮諾素和酸棗仁皂苷A的含量。
悟空K2025高效液相色譜儀：K2025P2二元高壓輸液泵、K2025AS自動進樣器、K2025CO柱溫箱、K2025UVD 紫外-可見光檢測器、K2025ELSD 蒸發光散射檢測器、Wookinglab色譜工作站；
色譜柱：C18，4.6×250 mm，5 µm或者相當的色譜柱；
流動相：以乙腈為流動相A，水為流動相B，按下表進行梯度洗脫：
注：為了系統在進樣前達到平衡，每次進樣前運行10min。
進樣量：酸棗仁皂苷A對照品溶液5 μL、15 μL，供試品溶液及斯皮諾素系列標準工作液10 μL；
洗針液：90 %甲醇水溶液；
柱溫：25℃；
檢測器及參數：紫外-可見光檢測器，檢測波長為335 nm；蒸發光散射檢測器，蒸發溫度為80℃，氣體流量為3.0 L/min。
重復性測試
按照色譜條件進行采集，將斯皮諾素標準溶液（濃度為50 μg/mL）進樣10 μL，色譜圖如圖1所示，積分結果如表1所示。
由表1中數據可知，斯皮諾素峰的理論塔板數為48818，拖尾因子為1.21，具有良好的峰形。
將斯皮諾素標準溶液連續進樣7針，疊加的色譜圖如圖2所示，結果見表2。
由表2中數據可知，斯皮諾素標準溶液連續進樣7針，保留時間的RSD為0.09 %，峰面積的RSD為0.40 %，具有良好的定性定量重復性。
按照色譜條件，將斯皮諾素系列標準工作液上機測定，斯皮諾素在5.0 μg/mL~200.0 μg/mL濃度范圍內呈現良好的線性關系，確定系數R2＞0.999。斯皮諾素系列標準工作液疊加的色譜圖如圖3所示。
酸棗仁皂苷A對照品溶液色譜圖
按照色譜條件進行采集，將酸棗仁皂苷A對照品溶液進樣15 μL，色譜圖如圖4所示，積分結果如表3所示。
由表3中數據可知，酸棗仁皂苷A峰的理論塔板數為503314，拖尾因子為1.08，具有良好的峰形。
外標兩點對數方程
精密吸取酸棗仁皂苷A對照品溶液5 μL、15 μL與供試品溶液10 μL，依次注入液相色譜儀中測定。不同進樣量酸棗仁皂苷A對照品溶液的色譜圖如圖5所示。
本實驗以乙腈和水為流動相，使用梯度洗脫條件，將紫外-可見光檢測器串聯蒸發光散射檢測器，對斯皮諾素和酸棗仁皂苷A的理論塔板數、重復性以及酸棗仁中斯皮諾素和酸棗仁皂苷A的含量進行測定，實驗結果表明：
斯皮諾素測定項目中，斯皮諾素峰的理論塔板數為48818，拖尾因子為1.21，具有良好的峰形；斯皮諾素標準溶液連續進樣7針，保留時間的RSD為0.09 %，峰面積的RSD為0.40 %，具有良好的定性定量重復性；斯皮諾素在5.0 μg/mL~200.0 μg/mL濃度范圍內呈現良好的線性關系，確定系數R2＞0.999。
酸棗仁皂苷A測定項目中，酸棗仁皂苷A峰的理論塔板數為503314，拖尾因子為1.08，具有良好的峰形。
因此，悟空 K2025高效液相色譜儀配置紫外-可見光檢測器串聯蒸發光散射檢測器，可同時對酸棗仁中斯皮諾素和酸棗仁皂苷A的含量進行測定。
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